DGL树枝状大分子是一种以赖氨酸为单体,通过缩聚反应形成的高度支化聚合物,属于树枝状大分子家族的重要成员。其结构由内核向外逐层扩展,形成具有明确代数(G1-G5)的树状球体,表面富含高密度活性氨基基团,内部存在可调控的纳米级空腔。这种独特结构赋予其精准的分子设计能力,可通过修饰氨基实现功能化,例如连接羧基、磺酸基、PEO等基团,或靶向配体(如抗体、叶酸)以增强生物相容性。
DGL的树枝状结构由内核、支化单元和外围基团组成,代数越高,分子尺寸和表面氨基密度越大。其表面氨基带正电荷,可与带负电的物质(如DNA、RNA、蛋白质)通过静电作用结合,形成稳定的复合物。内部纳米级空腔可包载药物分子,实现物理包封或化学键合。此外,DGL的降解产物为人体必需氨基酸(赖氨酸),生物毒性低,可控性高。
一、储存条件
储存形式:
冻干粉:通常为白色或类白色粉末,应密封保存于-20°C避光干燥环境,防止吸潮和降解。
溶液:若为液体形式,需根据说明书要求储存(通常为4°C短期保存,-20°C长期保存),避免反复冻融。
防潮避光:
树枝状大分子易吸湿,取用后应立即密封,置于干燥器中。
部分荧光标记或光敏型衍生物需避光保存。
有效期:
注意生产日期和保质期,过期产品可能导致性能下降或毒性增加。
二、溶解与配制
溶剂选择:
常用溶剂:去离子水、PBS缓冲液、生理盐水等。
避免使用含高浓度盐或有机溶剂的溶液,除非已验证其相容性。
溶解方法:
轻柔涡旋或轻微振荡助溶,避免剧烈超声或高速搅拌,以防结构破坏。
可轻微加热(如37°C)促进溶解,但温度不宜过高。
浓度控制:
严格按照实验设计或说明书推荐浓度使用。过高浓度可能导致细胞毒性或非特异性聚集。
三、生物实验使用注意事项
细胞毒性:
阳离子树枝状大分子(尤其是高代数G4以上)可能因表面正电荷与细胞膜相互作用而产生细胞毒性。
建议进行细胞毒性预实验(如CCK-8、MTT),确定安全使用浓度范围。
血清干扰:
血清蛋白可能与树枝状大分子结合,影响其与细胞的相互作用。需根据实验目的决定是否在含血清培养基中使用。
pH敏感性:
赖氨酸基树枝状大分子的电荷状态受pH影响,可能影响其与核酸(如DNA、siRNA)的复合能力(用于基因转染时)。
内毒素控制:
若用于细胞或动物实验,必须确保产品低内毒素(<1 EU/mg),避免引发非特异性免疫反应。
四、操作安全
个人防护:
操作时佩戴手套、口罩和实验服,避免吸入粉末或接触皮肤/眼睛。
废弃物处理:
含树枝状大分子的废液应按照实验室化学/生物废弃物处理规程进行收集和处置,不可直接倒入下水道。
五、其他注意事项
批次差异:
不同批次产品可能存在结构均一性、分子量分布差异,建议在关键实验中使用同一批次。
功能化修饰:
若使用表面修饰(如PEG化、靶向配体连接)的DGL,需注意修饰基团的稳定性与活性。
仪器兼容性:
高浓度溶液可能堵塞HPLC或微流控芯片,使用前需过滤(如0.22μm滤膜)。