3000转染试剂是目前分子生物学和细胞生物学研究中广泛使用的高效、低毒阳离子脂质体转染试剂。它专为将外源核酸(如质粒DNA、siRNA、miRNA或CRISPR-Cas9组件)高效导入哺乳动物细胞而设计,适用于多种贴壁和部分悬浮细胞系,包括难转染的原代细胞和干细胞。
其核心优势在于其双组分系统:除主转染试剂Lipofectamine™3000外,还包含P3000™增强剂。P3000™可与DNA预先混合,优化核酸复合物的形成,显著提升转染效率和蛋白表达水平。该系统通过阳离子脂质体与带负电的核酸结合,形成稳定的脂质-核酸复合物,通过内吞作用进入细胞,并在胞内释放核酸,实现高效基因递送。
1、基因功能研究
通过过表达或敲低特定基因,研究其在细胞增殖、分化、凋亡等过程中的作用。
示例:转染肿瘤抑制基因质粒,观察肿瘤细胞生长抑制现象。
2、基因编辑
与CRISPR/Cas9、TALEN等系统结合,实现基因敲除、敲入或点突变。
优势:高转染效率提升基因编辑成功率,简化后续筛选步骤。
3、病毒包装
生产慢病毒、腺病毒等病毒载体(如将慢病毒重组体质粒转染293T细胞,收集病毒上清感染目标细胞)。
特点:支持大片段或复杂基因的包装,病毒滴度高。
4、药物研发
构建疾病模型(如转染与阿尔茨海默病相关的基因突变质粒),筛选潜在药物靶点。
示例:通过siRNA敲低药物靶基因,评估化合物对细胞表型的影响。
5、蛋白生产
在哺乳动物细胞中高效表达重组蛋白(如抗体、酶),用于结构研究或功能验证。
优势:低细胞毒性减少对蛋白活性的影响。
